检测实例:

丹酚酸B对照品检测案例分析

2008年6月，一家客户购买了我们的丹酚酸B对照品。我们报告检测含量在99％以上，但是客户收到样品检测以后，多次不同条件下检测都存在问题,通过多次沟通协作,一起解决了这个难题：

客户测试结果：
① 取用甲醇溶好了的丹酚酸B对照品1ml加0.8ml水稀释后进样分析如下：

岛津液相LC-10AT ，检测器为二极管阵列扫描
Hypersil BDS柱 200*4.6mm 5um 1ml/min 30℃
甲醇：乙腈：甲酸：水=33:11:1:55
进样量20ul 280nm tR=4.107min

Naturestandard评论：该色谱柱柱效已经很低，特别是硅羟基被污染很大，几乎没有保留。

②换色谱柱：
岛津ODS柱 250*4.6mm 5um 1ml/min 30℃
甲醇：乙腈：甲酸：水=33:11:1:55
进样量20ul 280nm tR=11.392min

Naturestandard评论：该色谱柱柱效在正常范围之类，但是峰型脱尾较为严重，存在两种可能：1）柱子以及柱子接口中死体积太大；2）仪器中存在较大死体积；

③流动相中不加酸：
岛津ODS柱 250*4.6mm 5um 1ml/min 30℃
甲醇：乙腈：水=33:11:56
进样量20ul 280nm 30min内没出峰

Naturestandard评论：酸对丹酚酸B峰型的影响还不至于这么大，出现此情况的原因可能为：样品没有完全进进去，因为在与图2中的11min左右有一个和微弱的峰型，应该是上一针中残留在定量环中的样品进入到了柱子，所以峰很低。如果酸的影响很大，样品和上一针一样的话，同样的11min左右不会有峰或者峰会很大。

④流动相中降低酸的比例：
岛津ODS柱 250*4.6mm 5um 1ml/min 30℃
甲醇：乙腈：水=33:11:0.5:55.5
进样量20ul 280nm tR=18.539min

Naturestandard评论：测试者认为可能是酸的影响，导致丹酚酸B的峰型一直不好看，所以降低了酸的比例。其实原因应该在于死体积过大，导致拖尾。

⑤流动相中增加酸的比例：
岛津ODS柱 250*4.6mm 5um 1ml/min 30℃
甲醇：乙腈：水=33:11:2:54
进样量20ul 280nm tR=11.808min

Naturestandard评论：加大酸后，仍旧拖尾，还是没有找到原因。

⑥减少进样量：10ul，其余同上，
岛津ODS柱 250*4.6mm 5um 1ml/min 30℃
甲醇：乙腈：水=33:11:2:54
进样量210ul 280nm tR=13min

甲醇溶好了的对照品1ml加0.8ml加了酸的流动相稀释后进样分析
流动相中增加酸的比例：岛津ODS柱 250*4.6mm 5um 1ml/min 30℃
甲醇：乙腈：水=33:11:2:54 进样量10ul（减少进样量） 280nm tR=11.808min

⑦让客户将他们配制的溶液寄回给我们,我们的分析结果如下，图如下：

Naturestandard评论：从以上分析得知，原因不在于柱子（图1，图2证明），不在于酸碱（图3，3，5证明），不在于样品本身（图7，包括路途运输的不稳定性），所以唯一的可能是色谱柱或者仪器本身。

⑧经过我们跟客户沟通，邮寄了一根新柱子给客户（免费试用一周），同时让客户检测接口等。最后问题得到了很好的解决，峰型特别好